以下是微生物限度檢查儀的標準操作流程及關鍵注意事項，整合最新操作規范（2025年）整理：

?一、操作前準備?

?環境消毒?

超凈臺紫外線照射30分鐘，操作臺面用75%乙醇擦拭。

操作人員穿戴無菌服、口罩及滅菌手套。

?儀器與耗材?

檢查真空泵壓力（30–60kPa）及管路密封性；

預滅菌濾膜（0.45μm）用無菌鑷子置于濾杯內，避免手部接觸；

固體培養基提前融化并冷卻至45℃備用。

?二、標準化操作步驟?

?步驟? ?操作要點? ?風險控制?

?1. 樣品處理? - 液體樣品（純化水）：直接取樣100ml

- 固體樣品（藥粉）：1:10稀釋于無菌生理鹽水35 含抑菌成分樣品需用硫乙醇酸鹽中和劑沖洗

?2. 安裝濾器? 濾杯唇形密封圈對齊基座，旋緊固定環防漏氣48 安裝后試抽濾100ml純化水驗證密封性

?3. 過濾富集? 負壓抽濾樣品（3–5min/100ml），含顆粒物樣品需預過濾防堵塞28 過濾速度＜1ml/min時更換濾膜

?4. 濾膜轉移? 無菌鑷夾取濾膜，?菌面朝上?貼于平板計數培養基，排除氣泡 轉移全程≤15秒，避免空氣污染

?5. 培養與計數? - 細菌：30–35℃培養48–72小時

- 霉菌/酵母菌：23–28℃培養5–7天810 培養皿倒置放置防冷凝水滴落

?特殊樣品處理?：

?抗生素類?：增加沖洗體積至500ml（如頭孢菌素）；

?高油脂樣品?：正己烷溶解后，用含吐溫80的緩沖液沖洗。

?三、關鍵注意事項?

?無菌控制?

濾膜拆封后立即使用，鑷子每批次火焰滅菌；

超凈臺風速≥0.45m/s，定期沉降菌監測。

?儀器維護?

濾杯使用后121℃高壓滅菌30分鐘；

每月用3%過氧化氫循環沖洗管路20分鐘；

真空泵每季度更換專用潤滑油。

?方法驗證?

新樣品需做?回收率試驗?（加標回收率70–130%為合格）；

濾膜完整性測試：過濾后注入100ml空氣，壓力下降≤5kPa